Методы выявления ротавируса: какие сдавать анализы?

Ротавирус является основной причиной тяжелого гастроэнтерита (воспаления желудка и тонкой кишки) у детей и частично – у взрослых. Считается, что каждый год ротавирус ответственен за приблизительно 25 миллионов обращений к врачу, двух миллионов госпитализаций и более 800 тысяч смертей среди детей в возрасте до пяти лет во всем мире. Хотя это заболевание имеет мировое распространение, большинство случаев смерти происходит в развивающихся странах.

Трудно отличить гастроэнтерит, вызванный ротавирусом, от других кишечных инфекций. Поэтому установление адекватного диагноза требует тестирования образцов кала с помощью доступных анализов. Тем не менее, при вспышке ротавируса, он обычно не ищется у пациентов с гастроэнтеритом, потому что результаты не изменяют клиническое ведение, которое в основном требует соответствующей регидратационной терапии.

Оглавление: 
История болезни и медицинский осмотр
Какие анализы сдавать при ротавирусе?
Экспресс-тесты на ротавирус

История болезни и медицинский осмотр

Основная цель сбора анамнеза и физического обследования заключается в том, чтобы оценить, обезвожен ли заболевший человек (чаще всего ребенок), а также получить потенциальную информацию о причине острого гастроэнтерита. Таким образом, анамнез должен включать в себя продолжительность болезни, частоту мочеиспускания, характер стула, тип рвоты, наличие лихорадки и оценку психического статуса.

Тремя основными признаками обследования для определения дегидратации у детей являются аномальный тургор кожи, патологический тип дыхания с одышкой и учащением дыхания, а также длительное время наполнения капилляров. Для оценки обезвоживания используются различные шкалы, основывающиеся на частоте мочеиспусканий и общих показателях. Рассказ о симптомах, имеющихся у пациента, также может значительно помочь в диагностике.

Измерение сывороточных электролитов (натрия, калия, кальция и магния) у детей и взрослых с дегидратацией от легкой до умеренной степени обычно не требуется. Вес ребенка (или взрослого) во время болезни по сравнению с весом после лечения используется для ретроспективного определения степени обезвоживания. Измерения удельного веса мочи и азота мочевины крови являются недостаточно показательными для определения тяжести дегидратации.

Какие анализы сдавать при ротавирусе?

Лабораторная диагностика ротавирусных инфекций в основном проводится с помощью иммуноферментного анализа, который включает обнаружение специфического антигена группы VP6 в стуле при диарее. Как альтернатива, иммунологическое обнаружение этого антигена может быть проведено путем захвата антигена из фекалий анти-VP6-специфическими антителами, иммобилизованными на латексе, нитроцеллюлозе или нейлоне.

Обратите внимание

Хотя используемые сегодня иммуноферментные анализы, проводимые для эпидемиологического надзора за ротавирусами, чувствительны и специфичны, они не показаны для всех больных поголовно. В период эпидемии ротавируса диагноз ставится только на основании клинических симптомов и наличия признаков обезвоживания.

Электронная микроскопия очень специфична для обнаружения ротавируса и обладает чувствительностью, сравнимой с иммуноферментными анализами. Однако метод трудоемкий, интенсивный и громоздкий для рутинного обнаружения ротавируса в большом количестве образцов кала. Кроме того, для достижения оптимальных результатов необходимы дорогостоящие инструменты и высококвалифицированный персонал. Поэтому данный метод применяют только в научных исследованиях и при необходимости точного подтверждения диагноза.

Ротавирусные двухсегментные нити РНК могут быть обнаружены в клинических образцах путем выделения вирусной РНК, последующего анализа с помощью электрофореза на полиакриламидном геле с окрашиванием серебром (поскольку ионы серебра образуют стабильный комплекс с нуклеиновыми кислотами).

Человеческий ротавирус демонстрирует четко определенные закономерности распределения генных сегментов, которые также известны как электроферотипы. Результаты электроферотипирования коррелируют с наличием вирусов определенной группы. Это помогает определить подтипы (штаммы) ротавируса. Следовательно, наличие различных паттернов электроферотипа долгое время считалось диагностическим признаком наличия отдельных ротавирусов. На основе праймеров, которые специфичны для различных ротавирусных генов, было разработано множество чувствительных традиционных методов полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией или в режиме реального времени (ОТ-ПЦР).

Эти методы были исключительно полезны при обнаружении ротавируса в тканях вне кишечника, а также для изучения корреляции между тяжестью заболевания, вирусной нагрузкой и продолжительностью выделения вируса в кале. Но в клинической диагностике эти методы применяют редко – они трудоемки и дорогостоящи.

Экспресс-тесты на ротавирус

vУчитывая важность правильной постановки диагноза и исключения опасных осложнений болезни, сегодня разработаны домашние экспресс-тесты для выявления ротавируса. Они особенно необходимы при выявлении инфекции у детей раннего возраста, при решении о госпитализации. По внешним характеристикам тест похож на многие другие – это полоски-кассеты с реактивами и полосками – контрольной и тестовой. При соблюдении инструкции по проведению теста результаты достаточно показательны.

Неудобством становится только то, что материалом для исследования служат фекалии, которые нужно собрать и обработать реактивом в специальном флакончике. В целом же тест не намного сложнее, чем на беременность или овуляцию. Все этапы тестирования проводятся согласно инструкции, поэтому ошибиться сложно.

Важно

Достоверность при правильном проведении всех этапов – высокая. Но важно проводить этот тест в острой стадии – в первый же день болезни.

Парецкая Алена, педиатр, медицинский обозреватель

1,531 total views, 1 views today